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Tagged: cancrocelluleGolgimutanteP53proteina tumoralestudiotuori La P53anche conosciuta come proteina tumorale 53 gene TP53è un fattore di trascrizione che regola il ciclo cellulare e ricopre la funzione di soppressore tumorale. Mda btc tradingview sua funzione è particolarmente importante negli organismi pluricellulari per sopprimere i tumori nascenti.

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I mutanti p53 promuovono la crescita, le metastasi e la chemioresistenza del tumore influenzando le vie e le funzioni cellulari fondamentali. Il modo in cui queste alterazioni si relazionano alla segnalazione oncogena è, tuttavia, in gran parte sconosciuto.

In questo lavoro indaghiamo come mut-p53 modifichi i processi cellulari alterando la comunicazione delle cellule cancerose con il loro microambiente. Come potenziali mediatori di questa attività ci siamo concentrati sui miRNA regolati da mut-p53, una classe di molecole in grado di modulare a più livelli interi processi cellulari.

Abbiamo scoperto che mut-p53, attraverso il suo target miRd, controlla il traffico secretorio mda btc tradingview cellule tumorali provocando la tubulo-vescicolazione del GA. Tra i miRNA la cui espressione è stata ridotta al knockdown di mut-p53 abbiamo identificato miRd, precedentemente segnalato per esercitare attività oncogeniche 21222324 Le regioni regolatorie genomiche di MIR30D non sono caratterizzate, tuttavia, la regione che circonda il sito di inizio della trascrizione mda btc tradingview28 mostrava segni di cromatina promotore attivo 29 Figura complementare.

Questo ci ha spinto a verificare se mut-p53 potesse regolare la trascrizione di miRd attraverso HIF. Come mostrato nella Fig. Abbiamo quindi chiesto se miRd influisce sulla secrezione proteica. Come mostrato in Fig. Il knockdown di mut-p53 ha ridotto in modo simile la secrezione, che è stata salvata dalla concomitante sovraespressione di miRd Fig. Questi risultati sono stati ricapitolati nelle cellule mut-p53 RH che esprimono MDA-MB Figura supplementare 3e e nelle cellule isogeniche derivate da MCF10A che esprimono mut-p53 RH o mut-p53 RK Figura supplementare 3findicando che diversi mutanti di p53 condividono la capacità di controllare il traffico secretorio, mentre il knockdown di wt-p53 non ha influenzato in modo significativo la secrezione proteica Figura complementare 3f.

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Abbiamo quindi confrontato i dati del secretoma mut-p53 con i dati del trascrittoma dipendente da mut-p53 e del proteoma ottenuti in precedenza nella stessa linea cellulare Questo fenotipo è stato confermato dalla colorazione per HPA una lectina che lega i glicani elaborati in cis -Golgi cisternaeGiantin un marker intercisternal cross-bridge e TGN46 un marker trans -Golgi Figura supplementare 5c.

Coerentemente, la ricostituzione delle immagini 3D utilizzando stack Z confocali ha rivelato un aumento da circa 10 a 60 elementi cis- Golgi per cellula mda btc tradingview seguito alla sovraespressione di miRd Figura 5d supplementare e Film 1.

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Questi risultati confermano che mut-p53 modifica la morfologia GA e miRd è uno dei principali mediatori di questa attività. Mentre le cellule di controllo mostravano la canonica ultrastruttura GA, le cellule con sovraesprimono miRd mostravano GA tubulo-vescicolate, caratterizzate da cisterne strette con pori larghi, connessioni intercisternali, invaginazioni di membrana e gonfiore delle cisterne Fig.

È stato rilevato anche un aumento del numero di vescicole COPI.

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La ricostituzione di singole cisterne è mostrata nella figura supplementare 5h-l. Mannii permette di seguire il traffico da Tron criptovaluta a mediale-trans Golgi 42 È interessante notare che questi geni sono stati associati al traffico vescicolare e ai processi di riciclaggio.

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È interessante notare che anche gli effetti indiretti del miRd, in particolare la stabilizzazione dei microtubuli come giudicato dalla colorazione per la tubulina acetilatapossono promuovere la secrezione. Questo ci ha spinto a esplorare se la riprogrammazione dei secretomi potrebbe influenzare la diafonia delle cellule tumorali con il loro microambiente.

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Da notare, questa proprietà si basa sulla componente proteica del secretoma, poiché è stata abolita dalla denaturazione termica. Entrambi gli effetti sono stati ridotti dal knockdown di mut-p53 e recuperati dalla sovraespressione di miRd nelle cellule mut-pKD.

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